to analyze the changes in human milk macronutrients: fat, protein, and lactose in natural human milk (raw), frozen and thawed, after administration simulation by gavage and continuous infusion.
Methodan experimental study was performed with 34 human milk samples. The infrared spectrophotometry using the infrared analysis equipment MilkoScan Minor® (Foss, Denmark) equipment was used to analyze the macronutrients in human milk during the study phases. The analyses were performed in natural (raw) samples and after freezing and fast thawing following two steps: gavage and continuous infusion. The non‐parametric Wilcoxon test for paired samples was used for the statistical analysis.
Resultsthe fat content was significantly reduced after administration by continuous infusion (p<0.001) during administration of both raw and thawed samples. No changes in protein and lactose content were observed between the two forms of infusion. However, the thawing process significantly increased the levels of lactose and milk protein.
Conclusionthe route of administration by continuous infusion showed the greatest influence on fat loss among all the processes required for human milk administration.
analisar as alterações dos macronutrientes gordura, proteína e lactose no leite humano natural, congelado e descongelado, após a simulação da administração da dieta por gavagem e infusão contínua.
Métodofoi conduzido um estudo experimental com 34 amostras de leite humano. Foi utilizada a técnica da espectofotometria infravermelha (Milko Scan Minor®) para analisar os macronutrientes do leite humano nas etapas do estudo. As amostras foram analisadas na forma natural (crua) e após congelamento e descongelamento rápido nas duas formas de infusão: gavagem e infusão contínua. Foi usado o teste não paramétrico de Wilcoxon para amostras pareadas na análise estatística.
Resultadoa gordura apresentou redução significativa após administração por infusão contínua (p<0,001), tanto durante administração na forma natural quanto na forma descongelada. Não houve alteração da proteína e lactose segundo forma de infusão no leite descongelado e no leite in natura. O processo de descongelamento aumentou significativamente os níveis de lactose e de proteína do leite.
Conclusãoa via de administração por infusão contínua foi o procedimento que mais influenciou na perda de gordura, dentre todos os processos necessários para administração do leite humano.
O leite humano é o alimento ideal para o recém‐nascido a termo e pré‐termo, facilitando o desenvolvimento.2 Em idades gestacionais menores que 34 semanas, os recém‐nascidos ainda não são incapazes de sugar, deglutir e respirar adequada e coordenadamente. Nesses casos, a administração da dieta oral deve ocorrer com a utilização de sondas, o que implica em coleta, manipulação, estocagem e administração do leite humano.3 Esses procedimentos podem comprometer a qualidade nutricional de leite, privando os recém‐nascidos pré‐termo de uma porção significativa de calorias provenientes da gordura.4–6
Vieira et al.7 observaram uma redução significativa da gordura entre o leite natural (cru) doado e o leite final a ser ofertado. Entre os processos relacionados à oferta do leite humano estudados, a maior redução ocorreu após a simulação da oferta do leite por infusão contínua.
O processamento de congelamento e descongelamento pode alterar as propriedades físico‐químicas do leite, portanto, as perdas durante a infusão contínua também podem ser afetadas por estas mudanças. O congelamento e o descongelamento favorecem a formação de micelas, que podem se aderir aos plásticos, facilitando a perda de gordura.4,7 Portanto, tornou‐se necessário esclarecer se esta perda maior na infusão contínua poderia estar sendo ocasionada pelo processo de descongelamento ou se a via de administração (gavagem ou infusão contínua) seria a maior responsável.
O objetivo deste estudo foi analisar as alterações dos macronutrientes gordura, proteína e lactose no leite humano natural, congelado e descongelado, após a simulação da administração da dieta por gavagem e infusão contínua.
MétodoFoi realizado um estudo experimental com amostras de leite humano proveniente de doadoras voluntárias do Banco de Leite Humano, do Instituto Nacional em Saúde da Mulher, da Criança e do Adolescente Fernandes Figueira. Todas as doadoras eram mães de recém‐nascidos a termo e o leite foi colhido no período da manhã.
O leite foi ordenhado através de expressão manual ou bomba elétrica e armazenado em frascos de vidro. Do total de volume coletado, foram utilizados 50mL, os quais foram divididos em três alíquotas de 10mL e uma de 20mL. Esta última foi congelada a ‐20°C por 24 horas, e descongelada em microondas por 45 segundos.6
Imediatamente após a ordenha do leite foram realizadas as análises do leite humano natural. Das três alíquotas de 10ml, uma foi identificada como referência (não sendo submetida a qualquer processamento); outra foi identificada para simulação da administração por gavagem; e a última para administração por infusão contínua.
Para administração por gavagem foi utilizada seringa de 10mL e sonda descartável siliconizada n° 4, sendo o conteúdo impulsionado pela força da gravidade.
Na administração por infusão contínua foi utilizada seringa de 10mL, sonda descartável siliconizada n° 4, perfusor de 120cm e bomba infusora Samtronic ST6000® (São Paulo, Brasil). O tempo estabelecido para infusão do leite humano foi de 1 hora. Todos os materiais e técnicas utilizados seguem a rotina da Unidade Neonatal do Instituto Fernandes Figueira/Fiocruz/Brasil.
A quantidade de gordura, proteína e lactose do leite humano foi dosada pela técnica da espectrofotometria infravermelha, através do aparelho Infrared Analysis (Milko Scan Minor 104®, Foss, Denmark), já validada para leite humano.7
O cálculo do tamanho amostral foi feito considerando a magnitude de diferença encontrada entre as dosagens de gordura nas duas formas de administração (gavagem e infusão contínua) no estudo de Vieira et al.7, com um poder de 90% e significância de 95%. Neste estudo, a magnitude de diferença foi de 0,94g/100mL. Considerando estes parâmetros, o tamanho amostral inicial foi de 16 amostras, o qual foi dobrado devido à variabilidade do conteúdo de gordura nas amostras de leite.8,9
As dosagens dos macronutrientes e calorias totais nas amostras do leite humano foram comparadas a cada etapa usando Teste de Wilcoxon para amostras pareadas (SPSS 20.0).
Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto Nacional da Saúde da Mulher, Criança e Adolescentes Fernandes Figueira, e foi solicitado o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido.
ResultadosForam analisadas 34 amostras de leite humano. Observou‐se uma variação dos macronutrientes entre as amostras doadas de 19% para gordura, 1,9% para proteína e 1,6% para lactose. Não foram analisadas amostras de pool de leite humano.
A média do conteúdo dos macronutrientes em g/100mL no leite natural foi de 3,05±1,18 para gordura, 1,22±0,50 para proteína e 6,09±0,55 para lactose. A média para as calorias totais foi de 56,66±11,76 Kcal/100mL.
A administração do leite por infusão contínua alterou significativamente os níveis de gordura quando comparado à gavagem, tanto durante a infusão do leite natural quanto no descongelado (tabela 1).
Valores das medianas, mínimo e máximo dos macronutrientes e calorias totais por 100mL do leite humano, segundo os processos estudados. Rio de Janeiro, 2013
| Vias de administração | Gorduraa | p | Proteínaa | p | Lactosea | p | Calorias Totaisb | p |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Natural | 2,9 (1,1‐5,8) | – | 1,1 (0,5‐2,6) | – | 6,4 (4,9‐6,7) | – | 54,9 (37,4‐87,5) | – |
| Natural gavagem | 3,0 (1,1‐5,8) | 0,054 | 1,2 (0,6‐2,6) | 0,060 | 6,4 (4,9‐6,8) | 0,110 | 55,4 (37,7‐88,0) | 0,052 |
| Natural | 2,9 (1,1‐5,8) | – | 1,1 (0,5‐2,6) | – | 6,4 (4,9‐6,7) | – | 54,9 (37,4‐87,5) | – |
| Natural infusão contínua | 2,7 (1,0‐5,9) | 0,000c | 1,2 (0,4‐2,7) | 0,308 | 6,4 (4,9‐6,8) | 0,190 | 53,1 (36,4‐84,0) | 0,001c |
| Natural | 2,9 (1,1‐5,8) | – | 1,1 (0,5‐2,6) | – | 6,4 (4,9‐6,7) | – | 54,9 (37,4‐87,5) | – |
| Descongelado gavagem | 2,8 (1,3‐5,8) | 0,335 | 1,3 (0,2‐2,5) | 0,046c | 6,5 (5,1‐7,2) | 0,000c | 54,3 (37,7‐83,6) | 0,966 |
| Natural | 2,9 (1,1‐5,8) | – | 1,1 (0,5‐2,6) | – | 6,4 (4,9‐6,7) | – | 54,9 (37,4‐87,5) | – |
| Descongelado infusão contínua | 2,4 (1,0‐5,1) | 0,000c | 1,3 (0,2‐2,5) | 0,007c | 6,5 (5,0‐7,0) | 0,096 | 53,2 (35,3‐78,2) | 0,185 |
| Natural gavagem | 3,0 (1,1‐5,8) | – | 1,2 (0,6‐2,6) | – | 6,4 (4,9‐6,8) | – | 55,4 (37,7‐88,0) | – |
| Descongelado gavagem | 2,8 (1,3‐5,8) | 0,108 | 1,3 (0,2‐2,5) | 0,014c | 6,5 (5,1‐7,2) | 0,000c | 54,3 (37,7‐83,6) | 0,726 |
| Natural infusão contínua | 2,7 (1,0‐5,9) | – | 1,2 (0,4‐2,7) | – | 6,4 (4,9‐6,8) | – | 53,1 (36,4‐84,0) | – |
| Descongelado infusão contínua | 2,4 (1,0‐5,1) | 0,091 | 1,3 (0,2‐2,5) | 0,017c | 6,5 (5,0‐7,0) | 0,001c | 53,2 (35,3‐78,2) | 0,871 |
| Natural gavagem | 3,0 (1,1‐5,8) | – | 1,2 (0,6‐2,6) | – | 6,4 (4,9‐6,8) | – | 55,4 (37,7‐88,0) | – |
| Natural infusão contínua | 2,7 (1,0‐5,9) | 0,000c | 1,2 (0,4‐2,7) | 0,812 | 6,4 (4,9‐6,8) | 0,123 | 53,1 (36,4‐84,0) | 0,000c |
| Descongelado gavagem | 2,8 (1,3‐5,8) | – | 1,3 (0,2‐2,5) | – | 6,5 (5,1‐7,2) | – | 54,3 (37,7‐83,6) | – |
| Descongelado infusão contínua | 2,4 (1,0‐5,1) | 0,000c | 1,3 (0,2‐2,5) | 0,147 | 6,5 (5,0‐7,0) | 0,060 | 53,2 (35,3‐78,2) | 0,040c |
Teste de Wilcoxon.
Foi observado também um aumento significativo de proteína quando o leite descongelado foi usado, comparado ao natural. Entretanto, não foi observada diferença significativa nos valores da proteína no leite descongelado ofertado por gavagem e infusão contínua. (tabela 1).
A utilização da gavagem não implicou em perdas dos macronutrientes tanto no leite natural quanto no descongelado (tabela 1).
A média da diferença entre o conteúdo de gordura no leite natural ofertado por gavagem e infusão contínua foi de 0,24±0,31 (mediana=0,18) e do leite descongelado ofertado por gavagem e infusão contínua foi de 0,26±0,17 (mediana 0,17).
A perda de gordura pelo descongelamento foi semelhante nas duas vias de administração (p=0,853). A diferença do conteúdo de gordura entre a forma natural e a descongelada foi de 0,3g/100mL para a infusão contínua e de 0,2g/100mL para a gavagem.
DiscussãoA análise da influência do manuseio do leite humano nos macronutrientes, desde sua obtenção até a oferta final ao recém‐nascido, é de grande importância quando se considera os efeitos da nutrição adequada no crescimento e desenvolvimento dos recém‐nascidos pré‐termo.2 Neste estudo observou‐se que a escolha da via de administração por infusão contínua compromete significativamente a concentração de gordura, seja no leite humano natural ou descongelado.
A perda de gordura é em geral atribuída à aderência desta no frasco, à lipólise ou à peroxidação de lipídio.10 A redução do conteúdo de gordura em leite humano descongelado também foi verificada em outros estudos,11,12 que sugerem que a lipólise continuaria ocorrendo no leite congelado.13,14 A gordura em repouso separa‐se facilmente e se adere ao frasco, sondas e seringas, o que reduz sua oferta ao recém‐nascido. Embora o efeito do congelamento/descongelamento não tenha sido estatisticamente significativo nas duas vias de infusão, a associação entre o descongelamento e a infusão contínua significou uma perda de 0,5g de gordura por 100mL de leite, causando uma redução de cerca de 18% no conteúdo de gordura do leite para 100mL, o que pode trazer importantes repercussões clínicas e nutricionais para os pré‐termo.1 Uma das formas de diminuir estas perdas é a homogeneização do leite antes da oferta ao recém‐nascido.15
Uma questão observada neste estudo foram as concentrações menores de gordura e de calorias totais no leite humano do que o relatado em outros estudos internacionais.8,9,16 Estudos no Brasil também já evidenciaram valores menores no conteúdo de gordura, embora técnicas diferentes tenham sido utilizadas.17,18
Em relação à proteína e à lactose, verificou‐se que, inesperadamente, seus valores aumentavam após o descongelamento. Após o congelamento/descongelamento houve aumento significativo nas suas concentrações. Este fato pode estar relacionado com a perda de água no congelamento e descongelamento (volatilização), sublimação e aumento da infrared absorvância de proteína no comprimento de onda 5.7μm, também observado em outros estudos e atribuído a estas propriedades.10,19 Além disto, o descongelamento do leite humano pode causar a agregação das micelas de proteína, resultando em uma variação do conteúdo proteico.20
Em relação ao conteúdo energético, observou‐se uma variação importante (50,1 Kcal/100mL) entre as amostras do leite natural estudadas, demonstrando a importância do controle relacionado ao conteúdo nutricional do material doado aos dos bancos de leite humano. O conteúdo energético do leite, em geral, está relacionado ao conteúdo de gordura, uma vez que a densidade calórica deste macronutriente é responsável pela maior parte das calorias do leite humano.7,8 Neste estudo, os valores energéticos foram menores nas amostras onde o conteúdo de gordura era menor.
Os processos usados desde a ordenha até a oferta do leite humano implicam, portanto, em alterações importantes nos seus macronutrientes, fato observado por diversos autores.4,7,16,19–24 As alterações encontradas segundo a via de infusão do leite também foram observadas nos estudos de Vieira et al.7 e de Stoks et al.25 O processo de infusão do leite por gavagem não ocasionou perdas significativas na gordura, provavelmente porque havia menos perda relacionada à aderência da gordura ao plástico, uma vez que a sonda é muito menor que os perfusores usados na infusão contínua. O tempo gasto para a infusão nas duas modalidades também pode ter influenciado.25
As limitações deste estudo consistem no fato de terem sido estudados apenas os macronutrientes e de ter sido utilizada apenas a forma de descongelamento rápido através do micro‐ondas. O aquecimento excessivo pode destruir os elementos imunológicos do leite humano, mas não necessariamente os componentes nutricionais que foram objeto deste estudo.26 A ANVISA e a Rede Brasileira de Bancos de Leite Humano, em seus manuais instrutivos, citam esta prática.6 Outro resultado encontrado neste estudo foi uma magnitude menor entre as diferenças nos valores de gordura segundo via de infusão, comparado ao estudo de Vieira et al.,7 o que implicaria em tamanhos amostrais maiores em estudos posteriores.
O leite humano continua a ser o melhor alimento a ser oferecido aos recém‐nascidos, inclusive aos pré‐termo, mas as perdas nutricionais de gordura relacionadas à infusão contínua devem ser consideradas quando se opta por esta via de administração.
FinanciamentoFAPERJ (Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro).
Conflitos de interesseA autora Maria Elisabeth L. Moreira foi palestrante da MeadJonhson, Nestlé e ABBOTT no último ano.
Como citar este artigo: Abranches AD, Soares FV, Junior SC, Moreira ME. Freezing and thawing effects on fat, protein, and lactose levels of human natural milk administered by gavage and continuous infusion. J Pediatr (Rio J). 2014;90:384–8.
