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&#233; um dist&#250;rbio inflamat&#243;rio raro&#44; caracterizado por infiltra&#231;&#227;o eosinof&#237;lica da parede gastrointestinal&#46; Demonstrou&#8208;se que tanto o mecanismo dependente de imunoglobulina E &#40;IgE&#41; quanto o mecanismo al&#233;rgico tardio mediado por c&#233;lulas Th2 est&#227;o envolvidos na patog&#234;nese da GEE&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">4&#44;5</span></a> A via de sinaliza&#231;&#227;o desencadeada pela TSLP tem sido extensivamente estudada e a up&#8208;regula&#231;&#227;o da pr&#243;pria citocina est&#225; ligada &#224; patog&#234;nese de in&#250;meras doen&#231;as relacionadas &#224;s c&#233;lulas Th2&#44; inclusive dermatite at&#243;pica&#44; asma e respostas al&#233;rgicas&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">6&#44;7</span></a> A presen&#231;a de uma acentuada up&#8208;regula&#231;&#227;o da citocina relacionada&#44; observada na l&#226;mina pr&#243;pria de pacientes com GEE&#44; levou&#8208;nos &#224; hip&#243;tese de que uma desregula&#231;&#227;o da express&#227;o da TSLP poderia estar implicada nessa condi&#231;&#227;o&#46; Com base nisso&#44; exploramos a express&#227;o e fun&#231;&#227;o da TSLP da mucosa na GEE&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0070">M&#233;todos</span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0075">Pacientes e tecidos</span><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A mucosa foi biopsiada a partir do intestino ou c&#243;lon de pacientes com GEE &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>17&#44; com m&#233;dia de 7&#44;4 &#177; 0&#44;97 anos&#44; faixa de um a 13 anos&#41; no momento da endoscopia de rotina&#46; Os esp&#233;cimes da bi&#243;psia inclu&#237;ram mucosa intestinal &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>15&#41; e mucosa do c&#243;lon &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#41;&#46; Como controle&#44; amostras da mucosa do c&#243;lon &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>24&#41; foram obtidas de tecido saud&#225;vel &#40;a pelo menos 7<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>cm de dist&#226;ncia do p&#243;lipo&#41; de pacientes &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>24&#44; m&#233;dia de 5&#44;2 &#177; 0&#44;67 anos&#44; varia&#231;&#227;o de dois a 12 anos&#41; submetidos &#224; endoscopia para p&#243;lipos c&#243;licos&#46; O diagn&#243;stico foi baseado em tr&#234;s crit&#233;rios&#44; a saber&#58; &#40;1&#41; presen&#231;a de sintomas gastrointestinais&#59; &#40;2&#41; evid&#234;ncia histol&#243;gica de infiltra&#231;&#227;o eosinof&#237;lica &#40;eos &#62; 20&#47;HPF&#41; em uma ou mais &#225;reas do trato gastrointestinal&#59; e &#40;3&#41; exclus&#227;o de outras causas de eosinofilia tecidual&#46; Todos os tecidos foram obtidos de pacientes que assinaram um termo de consentimento informado aprovado pelo Conselho de &#201;tica Institucional e permitiram que o material n&#227;o necess&#225;rio para o diagn&#243;stico fosse usado para fins de pesquisa&#46;</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0080">Extra&#231;&#227;o de RNA e an&#225;lise da express&#227;o de RNAm por RT&#8208;PCR quantitativa</span><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O RNA total foi isolado a partir de biopsia com o reagente de RNA Trizol&#174; &#40;TaKaRa&#44; Jap&#227;o&#41;&#46; A s&#237;ntese de DNAc &#40;DNA complementar&#41; foi feita com HiScript QRT SuperMix&#174;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>gDNA wiper &#40;Vazyme Biotech&#44; China&#41;&#46; A PCR quantitativa em tempo real &#40;RT&#8208;PCR&#41; foi feita no sistema ABI 7500 Real&#8208;Time PCR Detection System&#44; com ChamQ SYBR qPCR Master Mix &#40;Vazyme Biotech&#44; China&#41;&#46; As sequ&#234;ncias de primers foram as seguintes&#58; TSLP <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CCCAGGCTATTCGGAAACTCAG&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CGCCACAATCCTTGTAATTGTG&#8208;3&#8217; &#40;esses primers n&#227;o distinguem entre as duas isoformas da TSLP&#41;&#59; TSLP longa <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CACCGTCTCTTGTAGCAATCG&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;TAGCCTGGGCACCAGATAGC&#8208;3&#8217;&#59; TSLP curta <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CCGCCTATGAGCAGCCAC&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CCTGAGTAGCATTTATCTGAG&#8208;3&#8217;&#46; Tipicamente&#44; foram feitos 40 ciclos de 20s a 95 &#730;c e 20s a 60 &#730;c&#44; seguido pelo protocolo de dissocia&#231;&#227;o t&#233;rmica para o m&#233;todo de detec&#231;&#227;o Fast SYBR Green&#46; As rea&#231;&#245;es da PCR foram normalizadas pela an&#225;lise da express&#227;o de GAPDH com os seguintes primers&#58; GAPDH <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;GCACCGTCAAGGCTGAGAAC&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;ATGGTGGTGAAGACGCCAGT&#8208;3&#8217;&#46; A quantidade de cada RNAm foi normalizada para a quantidade de GAPDH na mesma amostra&#46; Aumentos relativos na express&#227;o de RNAm foram calculados com o m&#233;todo 2<span class="elsevierStyleSup">&#8208;&#916;&#916;CT</span>&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0085">An&#225;lise estat&#237;stica</span><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Os dados foram analisados estatisticamente com o <span class="elsevierStyleItalic">software</span> SPSS vers&#227;o 17&#46;0 &#40;SPSS&#44; Inc&#46;&#44; Chicago&#44; EUA&#41;&#44; com o teste U n&#227;o param&#233;trico de Mann-Whitney &#40;para compara&#231;&#227;o dos dados <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> obtidos em diferentes grupos de pacientes para dados sem distribui&#231;&#227;o normal&#41;&#46; Os valores s&#227;o dados como medianas e intervalos&#46; Para a compara&#231;&#227;o multigrupos&#44; o teste de Kruskal&#8208;Wallis foi usado para analisar dados sem distribui&#231;&#227;o normal&#44; respectivamente&#44; e os valores de P foram ajustados com a corre&#231;&#227;o de Bonferroni para compara&#231;&#245;es m&#250;ltiplas&#46; Os coeficientes de correla&#231;&#227;o foram obtidos pelo m&#233;todo de correla&#231;&#227;o de postos de Spearman com corre&#231;&#227;o para postos empatados&#46; Os dados categ&#243;ricos s&#227;o resumidos com n&#250;meros &#40;porcentagem&#41; e foram comparados atrav&#233;s do teste qui&#8208;quadrado&#46; Para todos os testes&#44; p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05 foi considerado significativo&#46;</p></span></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0090">Resultados</span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0095">Manifesta&#231;&#245;es cl&#237;nicas e achados endosc&#243;picos de pacientes com GEE</span><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Dezessete pacientes &#40;10 homens&#44; sete mulheres&#41; foram diagnosticados com GEE&#44; de acordo com os crit&#233;rios acima&#46; Os sintomas mais comuns e os achados endosc&#243;picos em nossa s&#233;rie s&#227;o mostrados na&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabela 1</a> Os achados endosc&#243;picos foram inespec&#237;ficos&#44; a maioria dos pacientes apresentou apenas mucosa hiper&#234;mica e edematosa&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Doze pacientes com doen&#231;a da mucosa de grau leve foram tratados com sucesso com uma dieta de elimina&#231;&#227;o&#46; Cinco pacientes foram tratados com prednisolona&#44; inicialmente com uma dose de 0&#44;5&#8208;1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;dia&#44; gradualmente diminuindo ao longo de quatro a seis semanas&#46; Dos cinco pacientes&#44; quatro apresentaram al&#237;vio dos sintomas em uma semana&#44; enquanto um paciente com dor abdominal melhorou em duas semanas&#46; Quatro pacientes sofreram complica&#231;&#245;es devido ao hist&#243;rico de alergia alimentar&#44; mas nenhum deles apresentou complica&#231;&#245;es com asma br&#244;nquica ou esofagite eosinof&#237;lica&#46;</p></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0100">Infiltrados eosinof&#237;licos de pacientes com GEE</span><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Em nosso estudo&#44; o diagn&#243;stico definitivo foi estabelecido por bi&#243;psia endosc&#243;pica em 17 pacientes&#46; Havia 28 amostras de bi&#243;psia&#44; inclusive 15 do &#237;leo proximal e 13 do c&#243;lon&#46; Os infiltrados eosinof&#237;licos geralmente apresentam distribui&#231;&#227;o desigual e podem ser necess&#225;rias m&#250;ltiplas bi&#243;psias profundas para estabelecer o diagn&#243;stico&#46; O pico de contagem eosinof&#237;lica foi maior do que 50&#47;campo de alta pot&#234;ncia &#40;HPF&#44; do ingl&#234;s <span class="elsevierStyleItalic">High Power Field</span>&#41; em cinco amostras de bi&#243;psia&#44; inclusive tr&#234;s amostras de bi&#243;psia do intestino e duas amostras de bi&#243;psia do c&#243;lon &#40;material suplementar&#41;&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0105">Express&#227;o das TSLPs da mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE</span><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Existem tr&#234;s variantes de transcritos &#40;base de dados RefSeq&#41;&#44; mas apenas duas originam RNA codificadores&#58; a variante 1 do transcrito can&#244;nico da TSLP &#40;NM&#95;033035&#95;hg19 160 chr5&#58; 110407589&#8208;110411772&#41; e a variante 2 do transcrito &#40;NM&#95;138551&#95;hg19 64cr5&#58; 110409281&#8208;110411772&#41;&#46; Os dois transcritos codificadores codificam para a isoforma longa da TSLP de 159 amino&#225;cidos &#40;variante 1&#41; e para a TSLP curta &#40;variante 2&#41;&#44; que engloba os &#250;ltimos 63 res&#237;duos da TSLP longa e &#233; id&#234;ntica &#224; sua por&#231;&#227;o C&#8208;terminal&#46; Avaliamos os transcritos da TSLP da mucosa &#40;total&#58; isoformas da TSLP curta<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>longa&#41; por qRT&#8208;PCR &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>&#41;&#46; Ap&#243;s normaliza&#231;&#227;o para GAPDH&#44; o RNAm da TSLP estava significativamente reduzido na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles saud&#225;veis &#63;&#63;&#40;p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;0001&#41;&#46; Tamb&#233;m medimos os transcritos das isoformas longas e curtas da TSLP na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE e controles e descobrimos uma quantidade significativamente menor de RNAm da TSLP curta na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles &#40;p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#41;&#44; e uma quantidade significativamente maior de RNAm da TSLP longa na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles &#40;p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#41;&#46; Al&#233;m disso&#44; avaliamos os transcritos da TSLP da mucosa nos pacientes com GEE e hist&#243;rico de alergia alimentar &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#41; e os pacientes com GEE sem hist&#243;rico de alergia alimentar &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#41; e n&#227;o encontramos signific&#226;ncia estat&#237;stica entre dois grupos &#40;p &#62; 0&#44;05&#44; dados n&#227;o mostrados&#41;&#46; Tamb&#233;m avaliamos os transcritos da TSLP da mucosa em diferentes grupos de manifesta&#231;&#245;es cl&#237;nicas &#40;dor abdominal&#44; diarreia&#44; v&#244;mitos e sangramento retal&#41; e observamos que n&#227;o houve signific&#226;ncia estat&#237;stica &#40;p &#62; 0&#44;05&#44; dados n&#227;o mostrados&#41;&#46; Avaliamos ainda os transcritos da TSLP da mucosa em pacientes com GEE tratados com prednisolona &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>5&#41; e pacientes com GEE tratados com dieta de elimina&#231;&#227;o &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>12&#41; e n&#227;o encontramos signific&#226;ncia estat&#237;stica entre os dois grupos &#40;p &#62; 0&#44;05&#44; dados n&#227;o mostrados&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0050" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0110">Raz&#245;es TSLP curta&#47;longa est&#227;o comprometidas em pacientes com GEE</span><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Considerando que a TSLP longa n&#227;o &#233; expressa sob condi&#231;&#245;es de estado estacion&#225;rio&#44; sabemos agora que a redu&#231;&#227;o na express&#227;o da TSLP na mucosa gastrointestinal na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles foi atribu&#237;da &#224; falta de express&#227;o da TSLP curta&#44; embora uma quantidade significativamente maior de express&#227;o do RNA da TSLP longa na GEE ocorra&#44; quando comparada com os controles&#46; Analisamos as raz&#245;es TSLP curta&#47;longa na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE e de pacientes com controles saud&#225;veis&#46; Descobrimos que as raz&#245;es TSLP curta&#47;longa estavam significativamente reduzidas nos tecidos de pacientes com GEE em compara&#231;&#227;o com as taxas observadas em controles saud&#225;veis &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0055" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0115">Correla&#231;&#227;o entre a express&#227;o das TSLPs e a contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE</span><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O pico m&#233;dio de contagem eosinof&#237;lica m&#233;dia na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE e controles saud&#225;veis &#233;&#44; respectivamente&#44; 42&#44;79 &#177; 3&#44;50&#47;HPF e 4&#44;33 &#177; 0&#44;57&#47;HPF&#46; O pico da contagem eosinof&#237;lica est&#225; correlacionado positiva e significativamente com a express&#227;o do RNAm da TSLP longa na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE &#40;r<span class="elsevierStyleInf">s</span><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;623&#44; p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;005&#44; <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 3</a>A&#41;&#44; enquanto o pico de contagem eosinof&#237;lica est&#225; negativa e significativamente correlacionado com a express&#227;o do RNAm da TSLP curta na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE &#40;r<span class="elsevierStyleInf">s</span><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#8208;0&#44;4474&#44; p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#44; <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 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Em 2009&#44; Harada et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> descreveram a exist&#234;ncia de duas variantes diferentes para TSLP em humanos&#44; as isoformas longa e curta da TSLP&#46; Como a sequ&#234;ncia dos 63 amino&#225;cidos que comp&#245;em a TSLP curta &#233; completamente hom&#243;loga ao C&#8208;terminal da forma longa&#44; anticorpos espec&#237;ficos para a forma curta n&#227;o est&#227;o dispon&#237;veis&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">2&#44;10</span></a> Assim&#44; vimos que at&#233; aquele ponto a express&#227;o diferencial das duas isoformas tinha sido estudada apenas atrav&#233;s de an&#225;lises quantitativas da rea&#231;&#227;o em cadeia da polimerase&#44; com pares de primers direcionados especificamente a uma ou outra variante do transcrito&#46; Neste trabalho&#44; detectamos o n&#237;vel do RNAm da TSLP&#44; isoformas longas e curtas da TSLP em pacientes com GEE ativa&#44; comparados com controles saud&#225;veis&#46; Observamos que os transcritos da TSLP da mucosa est&#227;o reduzidos em pacientes ativos com GEE em compara&#231;&#227;o com controles saud&#225;veis&#46; Quando analisamos a express&#227;o das isoformas da TSLP na GEE&#44; observamos um quadro ainda mais complexo&#46; Como esperado pelo que foi visto na literatura&#44; encontramos uma up&#8208;regula&#231;&#227;o da isoforma longa da TSLP em amostras de bi&#243;psia de les&#245;es da GEE em oposi&#231;&#227;o aos controles saud&#225;veis&#59; inesperadamente&#44; descobrimos que a TSLP curta estava downregulada de forma significativa em amostras de bi&#243;psia de les&#245;es da GEE&#46; Isso indica que temos um desequil&#237;brio adicional das duas isoformas em pacientes com GEE&#44; porque encontramos uma downregula&#231;&#227;o da TSLP curta concomitante com a up&#8208;regula&#231;&#227;o da TSLP longa&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Apesar da clara evid&#234;ncia de uma dicotomia para as duas isoformas da TSLP em humanos&#44; o papel da isoforma curta era pouco compreendido&#46; <span class="elsevierStyleItalic">In vivo</span>&#44; a TSLP longa &#233; up&#8208;regulada em condi&#231;&#245;es como dermatite at&#243;pica&#44; asma&#44; colite ulcerativa e mucosa oral exposta ao tabaco sem fuma&#231;a&#44; enquanto est&#225; ausente em tecidos saud&#225;veis&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">9&#44;11&#44;12</span></a> Em contraste com a TSLP longa&#44; a TSLP curta &#233; a forma predominante da TSLP constitutivamente expressa em tecido saud&#225;vel&#46; Tsilingiri et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0145"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> revelaram atividade imunomoduladora para a TSLP curta&#46; Eles descobriram que&#44; na presen&#231;a da TSLP curta&#44; as c&#233;lulas dendr&#237;ticas &#40;CDs&#41; respondem mais levemente &#224; infec&#231;&#227;o bacteriana&#46; Dois relat&#243;rios recentes tamb&#233;m mostraram uma atividade antimicrobiana de pept&#237;deos dentro da sequ&#234;ncia curta da TSLP&#44; indicaram uma poss&#237;vel atividade homeost&#225;tica adicional da TSLP curta <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span>&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">11&#44;12</span></a> Sob condi&#231;&#245;es inflamat&#243;rias&#44; a TSLP curta parece ser downregulada&#44; como a exposi&#231;&#227;o &#224; <span class="elsevierStyleItalic">Salmonella typhimurium</span> em c&#233;lulas Caco&#8208;2&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a> Curiosamente&#44; foi observada uma significativa downregula&#231;&#227;o do transcrito da TSLP curta em pacientes n&#227;o tratados com doen&#231;a cel&#237;aca&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0160"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a> o que est&#225; de acordo com a observa&#231;&#245;es anteriores para express&#227;o reduzida da TSLP curta em outra patologia intestinal&#44; a doen&#231;a de Crohn&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0165"><span class="elsevierStyleSup">14&#44;15</span></a> Isso contribui para a inflama&#231;&#227;o cr&#244;nica devido ao consequente comprometimento na diferencia&#231;&#227;o de c&#233;lulas dendr&#237;ticas tolerog&#234;nicas&#46; Por outro lado&#44; quando a TSLP longa &#233; up&#8208;regulada&#44; como em pacientes com dermatite at&#243;pica e colite ulcerativa&#44; presumivelmente atrav&#233;s da ativa&#231;&#227;o da prote&#237;na NF&#8208;&#954;B&#44; caracter&#237;stica da inflama&#231;&#227;o tanto na doen&#231;a inflamat&#243;ria intestinal quanto na dermatite at&#243;pica&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0175"><span class="elsevierStyleSup">16&#8211;18</span></a> um componente da Th2 &#233; induzido&#46; A cocultura de CDs estimuladas pela TSLP longa com c&#233;lulas CD4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T alog&#234;nicas resulta na gera&#231;&#227;o de c&#233;lulas Th2 inflamat&#243;rias&#44; produzi citocinas Th2 cl&#225;ssicas&#44; inclusive IL&#8208;4&#44; IL&#8208;5&#44; e IL&#8208;13&#46; O padr&#227;o de express&#227;o para as duas variantes da TSLP em pacientes com GEE revela que a forma longa &#233; induzida pela inflama&#231;&#227;o gastrointestinal&#44; enquanto a forma curta parece ser downregulada pela inflama&#231;&#227;o gastrointestinal&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Durante a eosinofilia&#44; os eosin&#243;filos s&#227;o regulados por quimiocinas e citocinas&#46; A TSLP promove a eosinofilia pela indu&#231;&#227;o das citocinas Th2&#44; inclusive a express&#227;o de IL&#8208;4&#44; IL&#8208;5 e IL&#8208;13&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0190"><span class="elsevierStyleSup">19</span></a> Camundongos transg&#234;nicos que superexpressam a TSLP t&#234;m n&#237;veis s&#233;ricos elevados de IL&#8208;5&#46; Al&#233;m disso&#44; a quimiotaxia de eosin&#243;filos induzida pela TSLP aumentou ap&#243;s a pr&#233;&#8208;incuba&#231;&#227;o com IL&#8208;3 e com o fator de necrose tumoral alfa &#40;TNF&#945;&#41; quando comparados com eosin&#243;filos que n&#227;o foram pr&#233;&#8208;incubados com IL&#8208;3 e TNF&#945;&#46; Estudos t&#234;m mostrado que a fosforila&#231;&#227;o da L&#8208;plastina induzida pela TSLP e a migra&#231;&#227;o de eosin&#243;filos podem ser mediadas pela via de sinaliza&#231;&#227;o da prote&#237;na&#8208;C quinase &#40;PKC&#41;&#46; Com base nesses dados&#44; avaliamos a correla&#231;&#227;o entre a TSLP e o pico da contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46; Nossos dados mostraram que a express&#227;o do RNAm da TSLP longa est&#225; positiva e significativamente correlacionada com o pico de contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46; No entanto&#44; a express&#227;o do RNAm da TSLP curta est&#225; negativa e significativamente correlacionada com o pico de contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tomadas em conjunto&#44; existe uma downregula&#231;&#227;o concomitante da TSLP curta e uma up&#8208;regula&#231;&#227;o da TSLP longa na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46; A express&#227;o anormal das TSLPs na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE pode estar envolvida na patog&#234;nese da GEE&#46; A a&#231;&#227;o potente demonstrada pelas TSLPs na GEE sugere que se deve levar em conta esses dois aspectos&#44; pode&#44; por um lado&#44; bloquear o potencial inflamat&#243;rio da TSLP longa quando essa &#233; up&#8208;regulada e&#44; por outro lado&#44; restabelecer a homeostase imune atrav&#233;s da administra&#231;&#227;o da TSLP curta ou drogas envolvidas na sua up&#8208;regula&#231;&#227;o&#44; quando a TSLP curta &#233; downregulada&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Houve algumas limita&#231;&#245;es neste estudo&#46; Primeiro&#44; &#233; de centro &#250;nico e o tamanho da amostra n&#227;o era grande&#44; o que restringe a generaliza&#231;&#227;o&#46; No entanto&#44; nossos dados foram representativos o suficiente para observar a altera&#231;&#227;o da express&#227;o da TSLP na mucosa com dano da mucosa gastrointestinal na GEE&#46; Mais estudos com maior n&#250;mero de pacientes s&#227;o necess&#225;rios para confirmar nossos achados&#46; Em segundo lugar&#44; investigamos apenas as mudan&#231;as na mucosa de dois locais em pacientes com GEE&#46; Idealmente&#44; mais amostras devem ser obtidas do tecido gastrointestinal onde os eventos inflamat&#243;rios est&#227;o ocorrendo&#46; No entanto&#44; as amostras obtidas por meio de bi&#243;psias gastrointestinais s&#227;o limitadas pela sua complexidade&#44; especialmente em pacientes pedi&#225;tricos&#46;</p></span><span id="sec0065" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0125">Financiamento</span><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este trabalho foi apoiado pela National Natural Science Foundation of China &#40;81672020&#41;&#46;</p></span><span id="sec0070" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0130">Conflitos de interesse</span><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Os autores declaram n&#227;o haver conflitos de interesse&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t">4 &#40;23&#44;53&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0 &#40;0&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;012&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Contagem eosinof&#237;lica no sangue perif&#233;rico &#40;10&#94;9&#47;L&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;87 &#177; 0&#44;49&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;25 &#177; 0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Manifesta&#231;&#227;o cl&#237;nicaDor abdominal &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">13 &#40;76&#44;47&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Diarreia &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4 &#40;23&#44;53&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&#244;mito &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4 &#40;23&#44;53&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Sangramento retal &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2 &#40;11&#44;76&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Achados endosc&#243;picos&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Mucosa hiper&#234;mica e edematosa&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">15&#40;88&#44;24&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Mucosa fri&#225;vel&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4&#40;23&#44;53&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Sangramento&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">3&#40;17&#44;65&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Mucosa nodularEros&#227;o&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2&#40;11&#44;76&#37;&#41;1&#40;5&#44;88&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
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Artigo Original
Abnormal thymic stromal lymphopoietin expression in the gastrointestinal mucosa of patients with eosinophilic gastroenteritis
Expressão anormal da linfopoietina estromal tímica na mucosa gastrointestinal de pacientes com gastroenterite eosinofílica
Hongmei Guo, Xiaolan Ji, Guang Yang, Yu Jin
Autor para correspondência
jinyuldyy@163.com

Autor para correspondência.
Children's Hospital Affiliated to Nanjing Medical University, Department of Gastroenterology, Nanjing, China
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expressa em n&#237;vel baixo&#47;indetect&#225;vel no estado estacion&#225;rio e upregulada durante a inflama&#231;&#227;o em v&#225;rios tecidos&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a> O receptor para a isoforma longa da TSLP&#44; chamado de TSLPR&#44; est&#225; bem caracterizado&#46; A isoforma longa exerce suas atividades biol&#243;gicas atrav&#233;s da liga&#231;&#227;o com o TSLPR&#44; leva &#224; fosforila&#231;&#227;o e ativa&#231;&#227;o do transdutor de sinal e ativador da transcri&#231;&#227;o &#40;STAT&#41;5&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a> No entanto&#44; o receptor para a isoforma curta da TSLP induz a fosforila&#231;&#227;o do supressor p38&#945;&#44; uma quinase regulada pelo sinal extracelular 1&#47;2 e Lyn&#44; mas n&#227;o tem efeito sobre a fosforila&#231;&#227;o do STAT5&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A gastroenterite eosinof&#237;lica &#40;GEE&#41; &#233; um dist&#250;rbio inflamat&#243;rio raro&#44; caracterizado por infiltra&#231;&#227;o eosinof&#237;lica da parede gastrointestinal&#46; Demonstrou&#8208;se que tanto o mecanismo dependente de imunoglobulina E &#40;IgE&#41; quanto o mecanismo al&#233;rgico tardio mediado por c&#233;lulas Th2 est&#227;o envolvidos na patog&#234;nese da GEE&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">4&#44;5</span></a> A via de sinaliza&#231;&#227;o desencadeada pela TSLP tem sido extensivamente estudada e a up&#8208;regula&#231;&#227;o da pr&#243;pria citocina est&#225; ligada &#224; patog&#234;nese de in&#250;meras doen&#231;as relacionadas &#224;s c&#233;lulas Th2&#44; inclusive dermatite at&#243;pica&#44; asma e respostas al&#233;rgicas&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">6&#44;7</span></a> A presen&#231;a de uma acentuada up&#8208;regula&#231;&#227;o da citocina relacionada&#44; observada na l&#226;mina pr&#243;pria de pacientes com GEE&#44; 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e &#40;3&#41; exclus&#227;o de outras causas de eosinofilia tecidual&#46; Todos os tecidos foram obtidos de pacientes que assinaram um termo de consentimento informado aprovado pelo Conselho de &#201;tica Institucional e permitiram que o material n&#227;o necess&#225;rio para o diagn&#243;stico fosse usado para fins de pesquisa&#46;</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0080">Extra&#231;&#227;o de RNA e an&#225;lise da express&#227;o de RNAm por RT&#8208;PCR quantitativa</span><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O RNA total foi isolado a partir de biopsia com o reagente de RNA Trizol&#174; &#40;TaKaRa&#44; Jap&#227;o&#41;&#46; A s&#237;ntese de DNAc &#40;DNA complementar&#41; foi feita com HiScript QRT SuperMix&#174;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>gDNA wiper &#40;Vazyme Biotech&#44; China&#41;&#46; A PCR quantitativa em tempo real &#40;RT&#8208;PCR&#41; foi feita no sistema ABI 7500 Real&#8208;Time PCR Detection System&#44; com ChamQ SYBR qPCR Master Mix &#40;Vazyme Biotech&#44; China&#41;&#46; As sequ&#234;ncias de primers foram as seguintes&#58; TSLP <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CCCAGGCTATTCGGAAACTCAG&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CGCCACAATCCTTGTAATTGTG&#8208;3&#8217; &#40;esses primers n&#227;o distinguem entre as duas isoformas da TSLP&#41;&#59; TSLP longa <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CACCGTCTCTTGTAGCAATCG&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;TAGCCTGGGCACCAGATAGC&#8208;3&#8217;&#59; TSLP curta <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CCGCCTATGAGCAGCCAC&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;CCTGAGTAGCATTTATCTGAG&#8208;3&#8217;&#46; Tipicamente&#44; foram feitos 40 ciclos de 20s a 95 &#730;c e 20s a 60 &#730;c&#44; seguido pelo protocolo de dissocia&#231;&#227;o t&#233;rmica para o m&#233;todo de detec&#231;&#227;o Fast SYBR Green&#46; As rea&#231;&#245;es da PCR foram normalizadas pela an&#225;lise da express&#227;o de GAPDH com os seguintes primers&#58; GAPDH <span class="elsevierStyleItalic">forward</span>&#44; 5&#8217;&#8208;GCACCGTCAAGGCTGAGAAC&#8208;3&#8217; e <span class="elsevierStyleItalic">reverse</span>&#44; 5&#8217;&#8208;ATGGTGGTGAAGACGCCAGT&#8208;3&#8217;&#46; A quantidade de cada RNAm foi normalizada para a quantidade de GAPDH na mesma amostra&#46; Aumentos relativos na express&#227;o de RNAm foram calculados com o m&#233;todo 2<span class="elsevierStyleSup">&#8208;&#916;&#916;CT</span>&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0085">An&#225;lise estat&#237;stica</span><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Os dados foram analisados estatisticamente com o <span class="elsevierStyleItalic">software</span> SPSS vers&#227;o 17&#46;0 &#40;SPSS&#44; Inc&#46;&#44; Chicago&#44; EUA&#41;&#44; com o teste U n&#227;o param&#233;trico de Mann-Whitney &#40;para compara&#231;&#227;o dos dados <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> obtidos em diferentes grupos de pacientes para dados sem distribui&#231;&#227;o normal&#41;&#46; Os valores s&#227;o dados como medianas e intervalos&#46; Para a compara&#231;&#227;o multigrupos&#44; o teste de Kruskal&#8208;Wallis foi usado para analisar dados sem distribui&#231;&#227;o normal&#44; respectivamente&#44; e os valores de P foram ajustados com a corre&#231;&#227;o de Bonferroni para compara&#231;&#245;es m&#250;ltiplas&#46; Os coeficientes de correla&#231;&#227;o foram obtidos pelo m&#233;todo de correla&#231;&#227;o de postos de Spearman com corre&#231;&#227;o para postos empatados&#46; Os dados categ&#243;ricos s&#227;o resumidos com n&#250;meros &#40;porcentagem&#41; e foram comparados atrav&#233;s do teste qui&#8208;quadrado&#46; Para todos os testes&#44; p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05 foi considerado significativo&#46;</p></span></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0090">Resultados</span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0095">Manifesta&#231;&#245;es cl&#237;nicas e achados endosc&#243;picos de pacientes com GEE</span><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Dezessete pacientes &#40;10 homens&#44; sete mulheres&#41; foram diagnosticados com GEE&#44; de acordo com os crit&#233;rios acima&#46; Os sintomas mais comuns e os achados endosc&#243;picos em nossa s&#233;rie s&#227;o mostrados na&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabela 1</a> Os achados endosc&#243;picos foram inespec&#237;ficos&#44; a maioria dos pacientes apresentou apenas mucosa hiper&#234;mica e edematosa&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Doze pacientes com doen&#231;a da mucosa de grau leve foram tratados com sucesso com uma dieta de elimina&#231;&#227;o&#46; Cinco pacientes foram tratados com prednisolona&#44; inicialmente com uma dose de 0&#44;5&#8208;1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;dia&#44; gradualmente diminuindo ao longo de quatro a seis semanas&#46; Dos cinco pacientes&#44; quatro apresentaram al&#237;vio dos sintomas em uma semana&#44; enquanto um paciente com dor abdominal melhorou em duas semanas&#46; Quatro pacientes sofreram complica&#231;&#245;es devido ao hist&#243;rico de alergia alimentar&#44; mas nenhum deles apresentou complica&#231;&#245;es com asma br&#244;nquica ou esofagite eosinof&#237;lica&#46;</p></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0100">Infiltrados eosinof&#237;licos de pacientes com GEE</span><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Em nosso estudo&#44; o diagn&#243;stico definitivo foi estabelecido por bi&#243;psia endosc&#243;pica em 17 pacientes&#46; Havia 28 amostras de bi&#243;psia&#44; inclusive 15 do &#237;leo proximal e 13 do c&#243;lon&#46; Os infiltrados eosinof&#237;licos geralmente apresentam distribui&#231;&#227;o desigual e podem ser necess&#225;rias m&#250;ltiplas bi&#243;psias profundas para estabelecer o diagn&#243;stico&#46; O pico de contagem eosinof&#237;lica foi maior do que 50&#47;campo de alta pot&#234;ncia &#40;HPF&#44; do ingl&#234;s <span class="elsevierStyleItalic">High Power Field</span>&#41; em cinco amostras de bi&#243;psia&#44; inclusive tr&#234;s amostras de bi&#243;psia do intestino e duas amostras de bi&#243;psia do c&#243;lon &#40;material suplementar&#41;&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0105">Express&#227;o das TSLPs da mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE</span><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Existem tr&#234;s variantes de transcritos &#40;base de dados RefSeq&#41;&#44; mas apenas duas originam RNA codificadores&#58; a variante 1 do transcrito can&#244;nico da TSLP &#40;NM&#95;033035&#95;hg19 160 chr5&#58; 110407589&#8208;110411772&#41; e a variante 2 do transcrito &#40;NM&#95;138551&#95;hg19 64cr5&#58; 110409281&#8208;110411772&#41;&#46; Os dois transcritos codificadores codificam para a isoforma longa da TSLP de 159 amino&#225;cidos &#40;variante 1&#41; e para a TSLP curta &#40;variante 2&#41;&#44; que engloba os &#250;ltimos 63 res&#237;duos da TSLP longa e &#233; id&#234;ntica &#224; sua por&#231;&#227;o C&#8208;terminal&#46; Avaliamos os transcritos da TSLP da mucosa &#40;total&#58; isoformas da TSLP curta<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>longa&#41; por qRT&#8208;PCR &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>&#41;&#46; Ap&#243;s normaliza&#231;&#227;o para GAPDH&#44; o RNAm da TSLP estava significativamente reduzido na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles saud&#225;veis &#63;&#63;&#40;p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;0001&#41;&#46; Tamb&#233;m medimos os transcritos das isoformas longas e curtas da TSLP na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE e controles e descobrimos uma quantidade significativamente menor de RNAm da TSLP curta na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles &#40;p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#41;&#44; e uma quantidade significativamente maior de RNAm da TSLP longa na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles &#40;p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#41;&#46; Al&#233;m disso&#44; avaliamos os transcritos da TSLP da mucosa nos pacientes com GEE e hist&#243;rico de alergia alimentar &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#41; e os pacientes com GEE sem hist&#243;rico de alergia alimentar &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#41; e n&#227;o encontramos signific&#226;ncia estat&#237;stica entre dois grupos &#40;p &#62; 0&#44;05&#44; dados n&#227;o mostrados&#41;&#46; Tamb&#233;m avaliamos os transcritos da TSLP da mucosa em diferentes grupos de manifesta&#231;&#245;es cl&#237;nicas &#40;dor abdominal&#44; diarreia&#44; v&#244;mitos e sangramento retal&#41; e observamos que n&#227;o houve signific&#226;ncia estat&#237;stica &#40;p &#62; 0&#44;05&#44; dados n&#227;o mostrados&#41;&#46; Avaliamos ainda os transcritos da TSLP da mucosa em pacientes com GEE tratados com prednisolona &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>5&#41; e pacientes com GEE tratados com dieta de elimina&#231;&#227;o &#40;n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>12&#41; e n&#227;o encontramos signific&#226;ncia estat&#237;stica entre os dois grupos &#40;p &#62; 0&#44;05&#44; dados n&#227;o mostrados&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0050" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0110">Raz&#245;es TSLP curta&#47;longa est&#227;o comprometidas em pacientes com GEE</span><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Considerando que a TSLP longa n&#227;o &#233; expressa sob condi&#231;&#245;es de estado estacion&#225;rio&#44; sabemos agora que a redu&#231;&#227;o na express&#227;o da TSLP na mucosa gastrointestinal na GEE em compara&#231;&#227;o com os controles foi atribu&#237;da &#224; falta de express&#227;o da TSLP curta&#44; embora uma quantidade significativamente maior de express&#227;o do RNA da TSLP longa na GEE ocorra&#44; quando comparada com os controles&#46; Analisamos as raz&#245;es TSLP curta&#47;longa na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE e de pacientes com controles saud&#225;veis&#46; Descobrimos que as raz&#245;es TSLP curta&#47;longa estavam significativamente reduzidas nos tecidos de pacientes com GEE em compara&#231;&#227;o com as taxas observadas em controles saud&#225;veis &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0055" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0115">Correla&#231;&#227;o entre a express&#227;o das TSLPs e a contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE</span><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O pico m&#233;dio de contagem eosinof&#237;lica m&#233;dia na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE e controles saud&#225;veis &#233;&#44; respectivamente&#44; 42&#44;79 &#177; 3&#44;50&#47;HPF e 4&#44;33 &#177; 0&#44;57&#47;HPF&#46; O pico da contagem eosinof&#237;lica est&#225; correlacionado positiva e significativamente com a express&#227;o do RNAm da TSLP longa na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE &#40;r<span class="elsevierStyleInf">s</span><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;623&#44; p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;005&#44; <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 3</a>A&#41;&#44; enquanto o pico de contagem eosinof&#237;lica est&#225; negativa e significativamente correlacionado com a express&#227;o do RNAm da TSLP curta na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE &#40;r<span class="elsevierStyleInf">s</span><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#8208;0&#44;4474&#44; p &#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#44; <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 3</a>B&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia></span></span><span id="sec0060" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0120">Discuss&#227;o</span><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O dist&#250;rbio gastrointestinal eosinof&#237;lico foi descrito pela primeira vez por Kaijer em 1937 e &#233; caracterizado pela infiltra&#231;&#227;o de eosin&#243;filos em diferentes camadas do trato gastrointestinal na aus&#234;ncia de causas secund&#225;rias&#46; De acordo com estudos anteriores&#44; a incid&#234;ncia da GEE &#233; estimada em aproximadamente 1&#8208;30&#47;100&#46;000&#46; Estudos recentes e relatos de casos demonstraram que essa incid&#234;ncia tem aumentado&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0135"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> A TSLP&#44; uma citocina imunorreguladora constitutivamente expressa pelos enter&#243;citos&#44; desempenha um papel importante na preserva&#231;&#227;o da toler&#226;ncia da mucosa durante a homeostase no intestino&#46; Em 2009&#44; Harada et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> descreveram a exist&#234;ncia de duas variantes diferentes para TSLP em humanos&#44; as isoformas longa e curta da TSLP&#46; Como a sequ&#234;ncia dos 63 amino&#225;cidos que comp&#245;em a TSLP curta &#233; completamente hom&#243;loga ao C&#8208;terminal da forma longa&#44; anticorpos espec&#237;ficos para a forma curta n&#227;o est&#227;o dispon&#237;veis&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">2&#44;10</span></a> Assim&#44; vimos que at&#233; aquele ponto a express&#227;o diferencial das duas isoformas tinha sido estudada apenas atrav&#233;s de an&#225;lises quantitativas da rea&#231;&#227;o em cadeia da polimerase&#44; com pares de primers direcionados especificamente a uma ou outra variante do transcrito&#46; Neste trabalho&#44; detectamos o n&#237;vel do RNAm da TSLP&#44; isoformas longas e curtas da TSLP em pacientes com GEE ativa&#44; comparados com controles saud&#225;veis&#46; Observamos que os transcritos da TSLP da mucosa est&#227;o reduzidos em pacientes ativos com GEE em compara&#231;&#227;o com controles saud&#225;veis&#46; Quando analisamos a express&#227;o das isoformas da TSLP na GEE&#44; observamos um quadro ainda mais complexo&#46; Como esperado pelo que foi visto na literatura&#44; encontramos uma up&#8208;regula&#231;&#227;o da isoforma longa da TSLP em amostras de bi&#243;psia de les&#245;es da GEE em oposi&#231;&#227;o aos controles saud&#225;veis&#59; inesperadamente&#44; descobrimos que a TSLP curta estava downregulada de forma significativa em amostras de bi&#243;psia de les&#245;es da GEE&#46; Isso indica que temos um desequil&#237;brio adicional das duas isoformas em pacientes com GEE&#44; porque encontramos uma downregula&#231;&#227;o da TSLP curta concomitante com a up&#8208;regula&#231;&#227;o da TSLP longa&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Apesar da clara evid&#234;ncia de uma dicotomia para as duas isoformas da TSLP em humanos&#44; o papel da isoforma curta era pouco compreendido&#46; <span class="elsevierStyleItalic">In vivo</span>&#44; a TSLP longa &#233; up&#8208;regulada em condi&#231;&#245;es como dermatite at&#243;pica&#44; asma&#44; colite ulcerativa e mucosa oral exposta ao tabaco sem fuma&#231;a&#44; enquanto est&#225; ausente em tecidos saud&#225;veis&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">9&#44;11&#44;12</span></a> Em contraste com a TSLP longa&#44; a TSLP curta &#233; a forma predominante da TSLP constitutivamente expressa em tecido saud&#225;vel&#46; Tsilingiri et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0145"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> revelaram atividade imunomoduladora para a TSLP curta&#46; Eles descobriram que&#44; na presen&#231;a da TSLP curta&#44; as c&#233;lulas dendr&#237;ticas &#40;CDs&#41; respondem mais levemente &#224; infec&#231;&#227;o bacteriana&#46; Dois relat&#243;rios recentes tamb&#233;m mostraram uma atividade antimicrobiana de pept&#237;deos dentro da sequ&#234;ncia curta da TSLP&#44; indicaram uma poss&#237;vel atividade homeost&#225;tica adicional da TSLP curta <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span>&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">11&#44;12</span></a> Sob condi&#231;&#245;es inflamat&#243;rias&#44; a TSLP curta parece ser downregulada&#44; como a exposi&#231;&#227;o &#224; <span class="elsevierStyleItalic">Salmonella typhimurium</span> em c&#233;lulas Caco&#8208;2&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a> Curiosamente&#44; foi observada uma significativa downregula&#231;&#227;o do transcrito da TSLP curta em pacientes n&#227;o tratados com doen&#231;a cel&#237;aca&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0160"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a> o que est&#225; de acordo com a observa&#231;&#245;es anteriores para express&#227;o reduzida da TSLP curta em outra patologia intestinal&#44; a doen&#231;a de Crohn&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0165"><span class="elsevierStyleSup">14&#44;15</span></a> Isso contribui para a inflama&#231;&#227;o cr&#244;nica devido ao consequente comprometimento na diferencia&#231;&#227;o de c&#233;lulas dendr&#237;ticas tolerog&#234;nicas&#46; Por outro lado&#44; quando a TSLP longa &#233; up&#8208;regulada&#44; como em pacientes com dermatite at&#243;pica e colite ulcerativa&#44; presumivelmente atrav&#233;s da ativa&#231;&#227;o da prote&#237;na NF&#8208;&#954;B&#44; caracter&#237;stica da inflama&#231;&#227;o tanto na doen&#231;a inflamat&#243;ria intestinal quanto na dermatite at&#243;pica&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0175"><span class="elsevierStyleSup">16&#8211;18</span></a> um componente da Th2 &#233; induzido&#46; A cocultura de CDs estimuladas pela TSLP longa com c&#233;lulas CD4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T alog&#234;nicas resulta na gera&#231;&#227;o de c&#233;lulas Th2 inflamat&#243;rias&#44; produzi citocinas Th2 cl&#225;ssicas&#44; inclusive IL&#8208;4&#44; IL&#8208;5&#44; e IL&#8208;13&#46; O padr&#227;o de express&#227;o para as duas variantes da TSLP em pacientes com GEE revela que a forma longa &#233; induzida pela inflama&#231;&#227;o gastrointestinal&#44; enquanto a forma curta parece ser downregulada pela inflama&#231;&#227;o gastrointestinal&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Durante a eosinofilia&#44; os eosin&#243;filos s&#227;o regulados por quimiocinas e citocinas&#46; A TSLP promove a eosinofilia pela indu&#231;&#227;o das citocinas Th2&#44; inclusive a express&#227;o de IL&#8208;4&#44; IL&#8208;5 e IL&#8208;13&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0190"><span class="elsevierStyleSup">19</span></a> Camundongos transg&#234;nicos que superexpressam a TSLP t&#234;m n&#237;veis s&#233;ricos elevados de IL&#8208;5&#46; Al&#233;m disso&#44; a quimiotaxia de eosin&#243;filos induzida pela TSLP aumentou ap&#243;s a pr&#233;&#8208;incuba&#231;&#227;o com IL&#8208;3 e com o fator de necrose tumoral alfa &#40;TNF&#945;&#41; quando comparados com eosin&#243;filos que n&#227;o foram pr&#233;&#8208;incubados com IL&#8208;3 e TNF&#945;&#46; Estudos t&#234;m mostrado que a fosforila&#231;&#227;o da L&#8208;plastina induzida pela TSLP e a migra&#231;&#227;o de eosin&#243;filos podem ser mediadas pela via de sinaliza&#231;&#227;o da prote&#237;na&#8208;C quinase &#40;PKC&#41;&#46; Com base nesses dados&#44; avaliamos a correla&#231;&#227;o entre a TSLP e o pico da contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46; Nossos dados mostraram que a express&#227;o do RNAm da TSLP longa est&#225; positiva e significativamente correlacionada com o pico de contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46; No entanto&#44; a express&#227;o do RNAm da TSLP curta est&#225; negativa e significativamente correlacionada com o pico de contagem eosinof&#237;lica na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tomadas em conjunto&#44; existe uma downregula&#231;&#227;o concomitante da TSLP curta e uma up&#8208;regula&#231;&#227;o da TSLP longa na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE&#46; A express&#227;o anormal das TSLPs na mucosa gastrointestinal de pacientes com GEE pode estar envolvida na patog&#234;nese da GEE&#46; A a&#231;&#227;o potente demonstrada pelas TSLPs na GEE sugere que se deve levar em conta esses dois aspectos&#44; pode&#44; por um lado&#44; bloquear o potencial inflamat&#243;rio da TSLP longa quando essa &#233; up&#8208;regulada e&#44; por outro lado&#44; restabelecer a homeostase imune atrav&#233;s da administra&#231;&#227;o da TSLP curta ou drogas envolvidas na sua up&#8208;regula&#231;&#227;o&#44; quando a TSLP curta &#233; downregulada&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Houve algumas limita&#231;&#245;es neste estudo&#46; Primeiro&#44; &#233; de centro &#250;nico e o tamanho da amostra n&#227;o era grande&#44; o que restringe a generaliza&#231;&#227;o&#46; No entanto&#44; nossos dados foram representativos o suficiente para observar a altera&#231;&#227;o da express&#227;o da TSLP na mucosa com dano da mucosa gastrointestinal na GEE&#46; Mais estudos com maior n&#250;mero de pacientes s&#227;o necess&#225;rios para confirmar nossos achados&#46; Em segundo lugar&#44; investigamos apenas as mudan&#231;as na mucosa de dois locais em pacientes com GEE&#46; Idealmente&#44; mais amostras devem ser obtidas do tecido gastrointestinal onde os eventos inflamat&#243;rios est&#227;o ocorrendo&#46; No entanto&#44; as amostras obtidas por meio de bi&#243;psias gastrointestinais s&#227;o limitadas pela sua complexidade&#44; especialmente em pacientes pedi&#225;tricos&#46;</p></span><span id="sec0065" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0125">Financiamento</span><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este trabalho foi apoiado pela National Natural Science Foundation of China &#40;81672020&#41;&#46;</p></span><span id="sec0070" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0130">Conflitos de interesse</span><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Os autores declaram n&#227;o haver conflitos de interesse&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">7&#44;40 &#177; 0&#44;97&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#44;24 &#177; 0&#44;67&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;06&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Sexo &#40;M F&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">10&#47;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">18&#47;6&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;273&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Alergia alimentar &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4 &#40;23&#44;53&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0 &#40;0&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;012&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Contagem eosinof&#237;lica no sangue perif&#233;rico &#40;10&#94;9&#47;L&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;87 &#177; 0&#44;49&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;25 &#177; 0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Manifesta&#231;&#227;o cl&#237;nicaDor abdominal &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">13 &#40;76&#44;47&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Diarreia &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4 &#40;23&#44;53&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&#244;mito &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4 &#40;23&#44;53&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Sangramento retal &#40;n&#44; porcentagem&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2 &#40;11&#44;76&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Achados endosc&#243;picos&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Mucosa hiper&#234;mica e edematosa&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">15&#40;88&#44;24&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Mucosa fri&#225;vel&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4&#40;23&#44;53&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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Informação do artigo
ISSN: 22555536
Idioma original: Português
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